Chromatographie, Mikrobiologische Kontrolle & Arzneiformen

Chromatographie

Chromatographie ist eine Methode, die Unterschiede im Verhalten der Trennung zwischen der mobilen Phase und der stationären Phase nutzt, um die Komponenten eines Gemisches zu trennen.

Säule

Die Säule trägt die stationäre Phase.

Mobile Phase

Die mobile Phase transportiert die Probe. Die Probenkomponenten, die mit der stationären Phase interagieren, verbringen mehr Zeit in der Säule. Wenn die Komponenten die Säule verlassen, können sie mit einem Detektor quantifiziert und zur weiteren Analyse entnommen werden.

Gaschromatographie, Dünnschichtchromatographie, Gel-Filtration, Ionenaustausch, Hydroxylapatit, hydrophobe Affinitätschromatographie, HPLC sind gängige Methoden.

HPLC

HPLC steht für Hochleistungsflüssigkeitschromatographie.

Einschränkungen der Chromatographie bei niedrigem Druck

Physikalisch unmöglich zu erhöhende Flussraten, kompressible Harze, lange Durchlaufzeiten (viele Stunden), große Probenmengen.

Entwicklungen

Die Entwicklung inkompressibler Harze, neue Techniken in der Säulenpackung, Mikropartikulierung der Harze und Fortschritte in der Spektrophotometrie haben HPLC erleichtert.

Typen von HPLC

Größenausschlusschromatographie, Ionenaustauschchromatographie, hydrophobe Interaktionschromatographie, Affinitätschromatographie, Umkehrphasenchromatographie.

Instrumentierung

Ein HPLC-System besteht aus einem Pumpensystem, das chemikalienbeständig ist und geringe Variabilität aufweist. Es arbeitet mit Drücken von 30 bis 400 atm und bietet konstanten Fluss (ohne Impulse) sowie gute Reproduzierbarkeit bei der Bildung von Gradienten.

Typen von Pumpen

Spritzenpumpen, Kolbenpumpen, Konstantdruck-Membranpumpen.

Detektoren

UV-Detektoren

UV-Detektoren sind für zwei oder mehr Wellenlängen gleichzeitig lesbar.

Diodenarray-Detektor

Diodenarray-Detektoren erfassen Frequenzen zwischen 200 und 600 nm in weniger als 1 Sekunde.

Weitere Komponenten sind: Säulenthermostat, Mikroporenvolumenzelle (analytisch oder präparativ), Lösungsmittel-Manager, Proben-Manager.

Mikrobiologische Kontrolle

Die mikrobiologische Kontrolle ist ein wesentlicher Bestandteil der Guten Herstellungspraxis (GMP) und umfasst Aspekte wie antibakterielle Wirkung, Sterilität und Pyrogenfreiheit.

Ziel

Erkennung von Pyrogenen, Pilzen, Bakterien, Hefen, mikrobiellen Toxinen und Filamenten.

Zweck

Bewertung und Quantifizierung von Prozessen, Rohstoffen und Endprodukten.

Handlungsebenen

Umgebung vs. Darreichungsform

Umgebung, Wasser, Personal. Darreichungsform selbst: Potenz, Grenzwerte.

Mikrobiologische Kontrolle der Arbeitsumgebung

Luft, Umgebungstemperatur: Schutzmaßnahmen in Produktionsstätten mit minimalem Kontaminationsrisiko.

Arbeitsumgebung

Kontrollierte Kontaminationsbereiche

M1 Umgebung: 100, M2 Atmosphäre: 10.000, M3 Umgebung: 100.000.

Methoden zur mikrobiologischen Kontrolle der Arbeitsumgebung

Sedimentationstechnik, Trypton-Soja-Agar (TSA), Sabouraud-Dextrose-Agar.

Technische Auswirkungen

TSA, Sabouraud-Dextrose-Agar.

Kontrolle der mikrobiologischen Arbeitsumgebung

Oberflächentupfer, Abklatschplatten, Spülproben.

Mikrobiologische Kontrolle von H₂O

Ionenaustauscherharze können Verunreinigungen freisetzen. Pseudomonas ist einer der gefährlichsten Schadstoffe.

Sensorische, physikalisch-chemische und unerwünschte Desinfektionsmittel werden überwacht.

Erreger

Analyse für mikrobiologische Grenzwerte

Gesamtcoliforme, Fäkalstreptokokken, Clostridium, Sulfitreduzierer. Alle müssen Null sein.

Einteilung der Wasserkörper

Trinkwasser, gereinigtes Wasser und Wasser für Injektionszwecke.

Personalkontrolle

Vor, während und nach der Arbeit; ärztliche Untersuchung. Das Personal muss ordnungsgemäß in Gesundheits- und Hygienemaßnahmen eingewiesen werden.

Partikel

Es gibt eine tägliche Freisetzung von Partikeln größer als 10 μm.

Hautoberfläche: 1,75 m²

Bestimmung des antibakteriellen Potenzials

Mikrobiologische Bewertung der antibakteriellen therapeutischen Wirksamkeit.

Antibakterielle Wirksamkeit der Therapie

Hemmende Wirkung auf die Entwicklung eines Organismus. Die antimikrobielle Aktivität kann unter gleichen Bedingungen mit dem Muster des antibakteriellen Wirkstoffs verglichen werden.

Bestimmung der antibakteriellen Wirksamkeit

Zylindrische Platte

Diffusionsmethode.

Turbidimetrische Methode

Küvetten zur Messung der Lichtintensität.

Sterilität

Die Anwendung bis hin zum Fertigprodukt übernimmt keine Garantie für die Sterilität der Charge (nicht-selektive Probenahme). Im Fall von Lösungen oder Großcontainern (≥ 50 ml) wird eine Membranfiltration durchgeführt.

GMP-FDA

Die gefährlichsten Schadstoffe sind sensibilisierende Materialien in niedriger Dosis und Penicillin im Prozess: Pulver, Klebstoffe, Gase, Sprays.

Mikrobiologische Kontrolle

Die Vermeidung von Kreuzkontamination jeglicher Art ist ein erstrebenswertes Ziel und in einigen Ländern wie den USA und Europa eine strenge Anforderung für Beta-Lactame und Cephalosporine.

Die FDA erlaubt keine Spuren von Penicillin in der Umgebung, wenn 0,05 IE Penicillin in Spritzen oder 0,5 IE in oralen Medikamenten vorhanden sind.

Arzneiformen

Chemische und physikalische Stabilität.

Physikalische Stabilität

Niederschlag, Veränderungen in der Löslichkeit, Auflösungsgeschwindigkeit, Phasentrennung von Emulsionen und scheinbar harmlose Veränderungen können die therapeutische Wirksamkeit beeinträchtigen.

Messbare physikalische Eigenschaften

Zeit, Temperatur und andere Faktoren können sich ändern. Parameter ermöglichen eine beschleunigte Stabilitätsprüfung.

Emulsionen

Oberflächenspannung (Kohäsion) + Grenzflächenspannung (Adhäsion) = Diffusionskoeffizient. Hohe Adhäsion, geringe Kohäsion, positiver Diffusionskoeffizient, schlechte Stabilität.

Physikalische Stabilität von Suspensionen

Viskosität, pH-Wert, Sedimentationsrate, Sedimenthöhe.

Tabletten

Niedriger Druck, hohe Auflösung, hohe Auflösungsgeschwindigkeit.

Lösungen und Suspensionen

Transparenz und Farbe, pH-Wert, Sterilität, Suspendierbarkeit, Größe und Form der Partikel, Stabilität der Konservierungsstoffe.

Cremes und Salben, Zäpfchen

Viskosität, Homogenität, pH-Wert, kristalline Form, Größe der Partikel, Stabilität der Konservierungsstoffe, Löslichkeit (Lipid/Wasser), Schmelzpunkt, Aussehen.

Tabletten und Kapseln

Bruchfestigkeit, Zerfallszeit, Auflösungszeit, Härte, Aussehen.

Behälter

Migration, Eindringen von Feuchtigkeit, Veränderungen im Aussehen der Verpackung.

Vitamin A

Ultraviolett- und Infrarotspektroskopie und Resonanz, BHT, Chinin.

Hand: 100-1000/cm²

Unterarm: 10.000-100.000/cm²

Kopfhaut: 1.000.000/cm²

Achselhöhlen: 1,10 Millionen/cm²

Laufende Nase: 10 Mio. / g

Speichel: 100 Mio. / g